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    基因擴增PCR儀原來是這樣進行工作的

    發布時間:2019-12-04   點擊次數:62次
       基因擴增PCR儀原來是這樣進行工作的
      人類對于核酸的研究已經有100多年的歷史。20世紀60年代末70年代初,人們致力于研究基因的體外分離技術。但是,由于核酸的含量較少,一定程度上限制了DNA的體外操作。Khorana于1971年zui早提出核酸體外擴增的設想:經過DNA變性,與合適引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復該過程便可克隆tRNA基因。
      基因擴增PCR儀是分子生物學研究極其重要的工具,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,基本原理是在試管中模擬細胞內的DNA復制,即人為創造核酸半保留復制條件,使目的DNA在細胞外完成擴增的過程,它可被看作是生物體外的特殊DNA復制。
      基因擴增PCR儀是將PCR技術的高效擴增與原位雜交的細胞定位結合起來,用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀,從而在組織細胞原位檢測單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列。原位PCR技術的待檢標本一般先經化學固定,以保持組織細胞的良好形態結構。細胞膜和核膜均具有一定的通透性,當進行PCR擴增時,各種成分,如引物、DNA聚合酶、核苷酸等均可進進細胞內或細胞核內,以固定在細胞內或細胞核內的RNA或DNA為模板,于原位進行擴增。由于被擴增的DNA片段不同,其zui佳退火溫度也不同,通過梯度設置,可一次性篩選出zui佳的退火溫度。這樣既可節省試驗時間,提高實驗效率,又能節約實驗成本。基因擴增PCR儀對于在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有著重要意義。
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